د نیوکلیک اسید ترکیب د جامد پړاو سیالیک امایډ ټرای ګلیسریډ میتود په کارولو سره ترسره کیږي ، په کوم کې چې د DNA 3′ پای په جامد مرحله سبسټریټ کې متحرک کیږي او نیوکلیوټایډونه د 3′ څخه تر 5′ لوري کې اضافه کیږي تر هغه چې مطلوب DNA ټوټه ترکیب شي. .دا د DNA پولیمیریز په کارولو سره د DNA ترکیب څخه توپیر لري.
د لومړۍ اډې 3′ پای د ترکیب په جریان کې په CPG کې متحرک کیږي ، د راتلونکي بیس 5′-OH د di-p-tolyl trityl DMT سره خوندي کیږي ، په بیس کې د امینو ګروپ د بینزویک اسید او 3′ سره خوندي دی. - OH بیا د امینو فاسفیت مرکب سره فعال کیږي.د 1 بیس د 5 5′-OH 1 بیس او د بلې بیس 3′-OH د فاسفیت ټرای ګلیسریډ جوړوي، چې بیا د فاسفیت ټرای ګلیسریډ ته د آیوډین سره اکسیډیز کیږي، د دویم بیس 5′-OH محافظت کونکي لخوا لرې کیږي. د راتلونکي بیس د اضافه کولو له لارې د ډیکلورواسیټیک اسید DM سایکل اضافه کول ، او د ترکیب وروسته په 5′-OH کې محافظت کونکي د ضعیف اسید سره لرې کیږي ټوټه د متمرکز امونیم هایدروکسایډ سره د جامد رال څخه جلا کیږي ، محافظت د بیس څخه لرې کیږي. د تودوخې لاندې د متمرکز امونیم هایدروکسایډ سره، امونیم هایدروکسایډ لیرې کیږي، ټوټه یې په خلا کې وچه شوې، او نیوکلیک اسید د مایع کروماتګرافي یا PAGE په واسطه پاکیږي.
د اولیګو ترکیب مرحلې
بندول
دد 5 پای DMT محافظت ګروپ د TCA حل اضافه کولو سره لرې شوی.
فعالول
د oligonucleotide monomer سره د فعالولو مخلوط کول د فعال oligonucleotide مونومر منځګړیتوب جوړوي.
جوړه کول
د 5-ټرمینل هایدروکسیل ګروپ د فعال اولیګونیوکلیوټایډ منځګړیتوب سره د تولید ضد تودوخې عکس العمل کې عکس العمل ښیې ترڅو یو غیر مستحکم فاسفیټ ټرای ګلیسریډ بانډ رامینځته کړي.
کیپینګ
د کیپینګ اجنټ اضافه کول د اضافي هایدروکسیل ګروپونو سره د ایسټیلیشن کیپینګ عکس العمل ترسره کوي کوم چې د کنډسینشن عکس العمل کې ښکیل ندي.
اکسیډیشن
د آیوډین محلول اضافه کول چې اوبه لري د غیر مستحکم فاسفیت بانډونو سره د اکسیډریشن په واسطه تعامل کوي ترڅو مستحکم فاسفوریک اسید ټرای ګلیسریډ بانډونه رامینځته کړي.
Cyanoethyl Cleavage
د نیوکلیک اسید محصول د ترکیب وروسته ، د فاسفیټ ټرای ګلیسریډ بانډ څخه سینانویتیل ګروپ لرې کولو لپاره د DEA محلول اضافه کولو سره.
پاکول او له منځه وړل
د نیوکلیک اسید ټوټې د یو متمرکز امونیم هایدروکسایډ محلول په اضافه کولو سره د جامد پړاو کیریر څخه پاکیږي او بیا د هډو د هایدروجن بانډونو څخه د محافظتي ګروپونو لرې کولو لپاره تودوخه کیږي.
د پوسټ وخت: نومبر-21-2022